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甲基化檢測(MSP/BSP/qMSP/HRM)

發布時間:2021/09/24
甲基化檢測(MSP/BSP/qMSP/HRM)

  實驗介紹DNA甲基化在人的正常發育、X染色體失活、衰老以及許多人類疾?。ㄈ绨l育畸形、癌癥、心血管疾病、糖尿病和神經心理失調等)過程中發揮重要作用,已經成為表觀遺傳學和表觀基因組學的重要研究內容。 DNA甲基化是表觀遺傳修飾的主要方式,它是由DNA甲基轉移酶(DNA methyl-transferase,Dnmt)催化S-腺苷甲硫氨酸作為甲基供體,將胞嘧啶轉變為5-甲基胞嘧啶(mC)的一種反應,它并不改變DNA的一級結構,卻在細胞的發育、基因的表達、及基因組的穩定性中起著重要的作用。CpG島的高甲基化是腫瘤中存在的普遍現象,而啟動子CpG島的高甲基化是除突變和缺失外腫瘤中抑癌基因失活的第三種機制。 因此,基因啟動子甲基化檢測在臨床診斷(如甲基化檢測與低劑量CT相結合)、藥物敏感性檢測等方面具有很高的應用價值。

 

  服務項目依據實驗目的及用途的不同,本公司可做以下幾種服務:

 

  1> MSP:甲基化定性分析

 

  2> qMSP:對于驗證的CpG Island,進行穩定的高度定量和靈敏的甲基化檢測分析

 

  3> BSP:甲基化克隆測序分析,一般挑選10-15個克隆進行測序分析,一般可以提供≥10個測序結果

 

  4> HRM:高分辨率溶解曲線進行甲基化分析

 

  交付結果:實驗報告、返還樣本及產物

 

  質量保證:客觀、公正、可信數據結果

 

  交付時間:大約10-15個工作日(根據預實驗、樣本數量情況決定)

 

  服務流程1、 依據客戶提供的基因及下游實驗,設計合成相應引物

 

  2、 DNA提取與質量分析

 

  3、 亞硫酸鹽修飾即CT轉換

 

  4、 預實驗驗證引物,優化PCR條件

 

  5、 MSP:普通PCR產物電泳

 

  qMSP:選擇合適的內參及優化后的引物,進行熒光定量PCR

 

  BSP:對普通PCR獲得的產物進行純化,TA克隆,挑選10-15個克隆進行測序,提供≥10個測序成功結果

 

  HRM:選擇優化后的引物,進行熒光定量PCR

 

  6、對實驗結果進行分析,撰寫詳細實驗報告,包括引物序列,包括DNA提取方法、DNA電泳圖、普通PCR電泳圖、qPCR擴增曲線、溶解曲線、院士程序、菌液PCR電泳圖、測序原始文件及測序結果分析,以及最終的甲基化程序分析。

 

  樣本要求可用于提取基因組的實驗材料,如細胞(≥105個)、組織(≥50mg)

 

  實驗周期:10-15個工作日(根據預實驗、樣本數量、基因情況決定)

 

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